所有堵孔的發(fā)生都跟采血的手法是否正確操作有關(guān)。攜帶大量的上皮細(xì)胞組織或者棉絮纖維都很容易堵孔，也很難排除，在大直徑的孔有時(shí)候會(huì)看到棉絮等物質(zhì)，像F820很多醫(yī)院都在反沖的時(shí)候見到大團(tuán)的棉絮從孔中沖出，這就是很好的例證，無論全自動(dòng)還是半自動(dòng)這樣的問題大多出現(xiàn)在預(yù)稀釋標(biāo)本中，全血標(biāo)本幾乎沒有。
　　抗凝出現(xiàn)問題，要么是抗凝比例不對(duì)（過高會(huì)導(dǎo)致衛(wèi)星現(xiàn)象，顯微鏡下能看到大細(xì)胞的周圍衛(wèi)星很多小細(xì)胞，造成細(xì)胞體積巨大而且還很難溶解），放置時(shí)間過短也是原因之一，這也是在25分鐘之內(nèi)測(cè)試分類不好血小板不穩(wěn)的重要原因，EDTA抗凝劑與血小板凝血因子反應(yīng)結(jié)合需要時(shí)間，這個(gè)時(shí)間隨著溫度的升高而縮短，這也就是天氣變冷的時(shí)候容易出現(xiàn)問題的原因。
　　凝血和混勻，血液凝固，混勻不好，抗凝劑使用不正確（枸櫞酸鈉、草酸等非血常規(guī)抗凝劑長時(shí)間使用會(huì)導(dǎo)致堵孔）。
　　以上這些常識(shí)性的東西大家都很清楚，這些情況一次沒有掌握或者處理好不會(huì)當(dāng)時(shí)或者這個(gè)標(biāo)本做完后就造成堵孔，而是有個(gè)時(shí)間的累計(jì)，多次出現(xiàn)上述情況才會(huì)發(fā)生的。下面還有幾種機(jī)理：
　　WBC通道的堵孔機(jī)理：溶血?jiǎng)﹩栴}，溶血不足是主要原因，要注意的是明顯的溶血不足會(huì)顯示出HGB的增高和WBC的上升，很容易給人們警示，這里說的是輕微溶血不足，在WBC和HGB上看不出數(shù)值的變化或者很輕微，WBC圖形上淋巴峰值前會(huì)有不規(guī)則上升曲線，這就要引起足夠的警惕了，一般這種情況出現(xiàn)，30天之內(nèi)就會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的堵孔。主要原因是溶血?jiǎng)┢茐募t細(xì)胞不完全或者紅細(xì)胞碎片發(fā)生粘連聚集造成的，這種情況持續(xù)長時(shí)間就會(huì)在小孔上附著，小孔上附著這些細(xì)胞碎片以及蛋白沉積就會(huì)像蓋房子的水泥一樣，一層一層的越積越厚，等懷疑可能堵孔再做濃縮清理就已經(jīng)很難清除了。稀釋液?jiǎn)栴}，稀釋液的理化指標(biāo)不合格，造成細(xì)胞無法正確稀釋間隔，游離不好就會(huì)造成細(xì)胞聚集，在直方圖上表現(xiàn)明顯，但出現(xiàn)堵孔問題往往在直方圖上無法看出問題，原因是更換試劑時(shí)都作了相應(yīng)的靈敏度和增益的調(diào)整，在定標(biāo)系數(shù)上也作了相應(yīng)的調(diào)整，這樣在直方圖上根本無法看出問題所在，更換理化指標(biāo)稍好的稀釋液就會(huì)發(fā)現(xiàn)直方圖明顯的變化，這一點(diǎn)要引起重視，這些試劑往往是銷售區(qū)域很小的廠家的產(chǎn)品，銷售醫(yī)院不多，且設(shè)備的養(yǎng)護(hù)也都是以保修名義自己承擔(dān)的。
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　　RBC通道的堵孔機(jī)理：血液標(biāo)本經(jīng)過成千上萬倍的稀釋后在紅細(xì)胞計(jì)數(shù)池進(jìn)行電阻法計(jì)數(shù)，在稀釋過程中除了稀釋液沒有其他的試劑干預(yù)。大家知道白細(xì)胞池經(jīng)過溶血?jiǎng)┑淖饔媚芏嗌傧恍┑鞍缀退槠母蓴_，而且往往是分配了白細(xì)胞的標(biāo)本且加入溶血?jiǎng)┖蜌馀葜惢旌虾蟛砰_始在紅細(xì)胞池進(jìn)行分配和稀釋的，而白細(xì)胞和紅細(xì)胞池是同時(shí)計(jì)數(shù)的，這樣紅細(xì)胞池的蛋白碎片懸浮活動(dòng)力就要高于白細(xì)胞池，而且從比例上講這些蛋白和碎片的比例也要高于白細(xì)胞池，這就是紅細(xì)胞堵孔的一個(gè)主要原因。
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　　負(fù)壓不足，有人說負(fù)壓不足會(huì)報(bào)警的。要知道儀器的報(bào)警電路都是有一個(gè)范圍的，長期處于負(fù)壓下限，或者認(rèn)為調(diào)整了負(fù)壓報(bào)警限制都會(huì)導(dǎo)致實(shí)際負(fù)壓不足。負(fù)壓不足導(dǎo)致堵孔的原因很好理解，大家都知道自來水是靠水泵來提供足夠的壓力供給千家萬戶的，沒聽說自來水管道會(huì)堵或者管道內(nèi)壁有什么附著物，但下水道往往都是靠自然高度排出的，水流的速度自然很低，這就給下水管道內(nèi)壁附著提供了很好的條件，所以大家看到的是下水管道內(nèi)壁污垢很厚。在血液分析儀上，負(fù)壓不足就會(huì)給蛋白、碎片附著在小孔上提供了有利的條件。所以，計(jì)數(shù)負(fù)壓，排空負(fù)壓的監(jiān)測(cè)調(diào)整一般在上限好一些，這樣留有的余地會(huì)大一些。經(jīng)常有人說小孔沒有堵，我處理過也檢查過，絕對(duì)可以肯定，但為什么就是報(bào)堵孔或者現(xiàn)象就是堵孔呢，先前這個(gè)問題問得最多的就是F820，其實(shí)就是負(fù)壓不足造成的。
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　　清洗劑問題，清洗劑的作用是清除小孔和管道的蛋白、碎片附著，如果清洗劑效果不好就起不到應(yīng)有的作用，勢(shì)必造成久后堵孔，這些清洗劑往往是每標(biāo)本測(cè)試后都要用到，理化指標(biāo)太高就會(huì)造成清洗劑的泡沫或者其他成分清理不干凈反而會(huì)影響計(jì)數(shù)，理化指標(biāo)太低，起不到效果，這也就是清洗劑僅次于稀釋液復(fù)雜程度的原因，國內(nèi)試劑配套往往是模仿，很少有人去做基礎(chǔ)驗(yàn)證和證據(jù)分析。還有的儀器沒有普通的清洗劑，只有濃縮清洗劑，這種清洗劑往往被人用次氯酸鈉替代了，過濾不好甚至根本就沒有過濾反而會(huì)造成大顆粒堵孔，沖洗不干凈會(huì)影響計(jì)數(shù)，而且會(huì)腐蝕管道和相關(guān)池、閥、泵等部件。有些儀器不僅有普通清洗劑，還有濃縮清洗劑，更有其他名目的清洗劑，分別在不同的部件上使用。遇到一個(gè)客戶關(guān)機(jī)前使用濃縮液后，第二天再開機(jī)反而本底很久不能通過，試劑都是儀器廠家的，我看了一下，醫(yī)院由于嫌稀釋血結(jié)果不可靠，都采用全血測(cè)試，就告訴他們，每天關(guān)機(jī)不要采用濃縮液連續(xù)一周，均沒有發(fā)生早上開機(jī)不通過現(xiàn)象，然后隔一天用濃縮液，就發(fā)現(xiàn)使用濃縮液的第二天就會(huì)本底不過，至于這批濃縮液出了什么問題我們不追究，這里僅給大家一個(gè)考慮問題的思路。還有的所謂濃縮液不用還好點(diǎn)兒，用上了不久反而會(huì)堵孔，當(dāng)然，這些都需要反復(fù)驗(yàn)證才可以結(jié)論。
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　　在有很多堵孔監(jiān)測(cè)電平/小孔高壓灼燒設(shè)計(jì)的儀器上，堵孔概率也很高，下面就解釋這個(gè)現(xiàn)象。堵孔電平的監(jiān)測(cè)機(jī)理是通過小孔兩邊的電極間的電壓差得到的，例如：計(jì)數(shù)電壓是100v，加上稀釋液后在小孔兩端的電壓只有36v，如果有堵孔發(fā)生，這個(gè)電壓會(huì)可能升高到４０－５０ｖ，小孔損壞破裂，這個(gè)電壓可能只有２０ｖ以下，甚至到０，這就是這個(gè)電平監(jiān)測(cè)的機(jī)理，當(dāng)然，在儀器上有直接顯示小孔電壓的，也就顯示的是恒流源輸出電壓的，也有的是用百分比來表示的，ＫＸ２１就是百分比表示。高壓灼燒的機(jī)理是在小孔兩端的電極上加上高頻計(jì)數(shù)電壓，正常計(jì)數(shù)的時(shí)候，計(jì)數(shù)電壓是持續(xù)提供的直流電壓，而在高壓灼燒的時(shí)候，就會(huì)設(shè)計(jì)成間隔很短時(shí)間的通電斷電，這樣就形成高頻，在通斷電的瞬間，兩個(gè)電極之間就會(huì)產(chǎn)生拉弧放電，電火花的發(fā)出點(diǎn)就是小孔，這樣就會(huì)很輕易的將蛋白、碎片清除掉，也有的儀器設(shè)計(jì)成單獨(dú)交流供電，在電極線的前端通過繼電器或者可控硅來控制。高壓灼燒要想達(dá)到理想的效果有兩個(gè)要素，一是電壓足夠引發(fā)拉弧放電的要求，電極氧化或者電極本身就有附著物勢(shì)必影響這個(gè)電壓，二是電極間隙不能太遠(yuǎn)，否則根本無法放電，以KX21來說，兩個(gè)池子一個(gè)能看到或者聽到放電聲和火花，另一個(gè)就沒有，追究下去都是動(dòng)過池子和處理過電極，間隙沒有調(diào)整好造成的，間隙不好高壓灼燒也就沒有效果，那么堵孔自然就會(huì)發(fā)生頻繁。還有的是關(guān)掉了高壓灼燒功能，例如AC920系列，其實(shí)關(guān)掉高壓灼燒從理論上來講也不應(yīng)該堵，只要前面的要素都掌握很好的情況下，但經(jīng)常有人說，關(guān)掉這個(gè)功能幾乎是每一個(gè)標(biāo)本都堵，第一是負(fù)壓，第二就是試劑，除此之外別的可能很小。
　　那么上述兩種設(shè)計(jì)都有的儀器為什么還是會(huì)有堵孔發(fā)生或者出現(xiàn)堵孔癥狀呢？答案在閥上，小孔確實(shí)沒有堵，也沒有報(bào)告提示，也就是說電平監(jiān)測(cè)正常，高壓灼燒也很正常，但就是計(jì)數(shù)低，而且是逐漸降低幾乎成線性，這是典型的堵孔癥狀，這些情況往往出現(xiàn)在稀釋血標(biāo)本采用比較多的儀器上，原因是稀釋血采集的時(shí)候，棉絮，毛發(fā)，纖維等通過毛細(xì)管混合到稀釋液當(dāng)中，計(jì)數(shù)的時(shí)候通過小孔進(jìn)入到下一級(jí)的閥膜上，閥膜往往是穹隆彎曲結(jié)構(gòu)，這就會(huì)降低流速從而為這些東西附著提供條件，日久天長就會(huì)越積越多，當(dāng)達(dá)到一定的數(shù)量就會(huì)堵塞或者半堵塞，這樣就會(huì)影響到計(jì)數(shù)時(shí)的吸液量，也就影響到計(jì)數(shù)數(shù)量，實(shí)際上這也是負(fù)壓?jiǎn)栴}，閥的堵塞造成計(jì)數(shù)負(fù)壓得不足。光電的所有設(shè)備電磁閥的堵塞情況非常嚴(yán)重，這跟閥的結(jié)構(gòu)有很大關(guān)系，液體在電磁閥里面要上兩層樓，而且壓力的提供又是蠕動(dòng)泵，這種泵能夠提供的壓力有限，而且壓力還不是連續(xù)的，所以光電這類的電磁閥經(jīng)常打開清理，也經(jīng)常能看到有棉絮類的東西在里面。重點(diǎn)提一句，光電的電磁閥材料很脆，拆卸安裝很容易破損或者螺絲滑扣，一旦出現(xiàn)這種情況閥就會(huì)漏氣，也就不能使用了。而以KX21為例，計(jì)數(shù)隔膜泵堵或者破損，也會(huì)出現(xiàn)計(jì)數(shù)低的情況，這個(gè)隔膜泵跟以往的不同，不大好拆卸處理，一般都是更換，所以代理商一般都有這個(gè)隔膜泵替換排查問題。KX21由于大量采用稀釋血標(biāo)本還會(huì)直接導(dǎo)致計(jì)數(shù)單元后面的兩對(duì)小孔后池的沖洗閥堵塞，這兩對(duì)閥堵塞會(huì)造成計(jì)數(shù)高，原因是這兩對(duì)閥在計(jì)數(shù)結(jié)束后清洗后池反沖，在計(jì)數(shù)的時(shí)候是關(guān)閉的，如果棉絮、毛發(fā)纖維等聚集堵塞，就會(huì)關(guān)閉不嚴(yán)，這個(gè)閥直接通向負(fù)壓瓶（廢液瓶），負(fù)壓瓶的壓力遠(yuǎn)大于隔膜泵的壓力，計(jì)數(shù)的時(shí)候兩個(gè)壓力同時(shí)加在小孔上，肯定以負(fù)壓瓶的壓力為主，由于壓力的增大細(xì)胞通過小孔的數(shù)量也就增多，計(jì)數(shù)就會(huì)高，而且這兩個(gè)閥堵塞，還會(huì)造成壓力不穩(wěn)，這些都是根據(jù)具體的情況分析。
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　　操作設(shè)置問題，這里以ABX MICROS60為例，先說一下這個(gè)設(shè)備的清洗機(jī)理，首先是每次計(jì)數(shù)結(jié)束時(shí)的清洗，在計(jì)數(shù)結(jié)束后，負(fù)壓泵排掉計(jì)數(shù)池廢液，然后打開4號(hào)閥讓清洗劑通過4號(hào)閥，兩個(gè)計(jì)數(shù)池的后池，再通過6號(hào)閥進(jìn)入負(fù)壓泵，時(shí)間很短，流過的清洗液官方說法0.85ml，非常少，然后分配泵上抬，將稀釋液通過11，7號(hào)閥的動(dòng)作沖洗兩個(gè)后池，清洗由清洗劑清洗過的管道，這樣就完成了一次清洗，這一切都非常快，不超過3秒鐘完成的。注意的有兩點(diǎn)，一，不是所有的版本都有這個(gè)功能，只有02年后的1.4版本和1.6版本的才有，二是清洗順序是白細(xì)胞到紅細(xì)胞的后池，清洗完白細(xì)胞后池后的清洗劑再清洗紅細(xì)胞的后池，這就給沉積附著提供條件，也是紅細(xì)胞嚴(yán)重堵孔比白細(xì)胞多而且嚴(yán)重的原因。但這不是唯一的原因，下面還要說明，這個(gè)儀器有一個(gè)自動(dòng)清洗功能就是AUTOCLEARN，這個(gè)動(dòng)作是這樣的，清洗液通過4號(hào)閥經(jīng)過兩個(gè)計(jì)數(shù)池的后池再通過6號(hào)閥進(jìn)入負(fù)壓泵，（這個(gè)時(shí)候兩個(gè)計(jì)數(shù)池已經(jīng)完全排空），通過時(shí)間定量大概吸取了7.6ml停止，然后通過12號(hào)閥將清洗液注入白細(xì)胞池，也是通過時(shí)間定量控制注入到白細(xì)胞池的有效容量是3ml，然后再吸取7.6ml的清洗劑，通過13號(hào)閥將清洗液注入紅細(xì)胞池3ml，之后，負(fù)壓泵排空后上拉，通過6號(hào)閥從兩個(gè)池子的小孔吸取10秒鐘的清洗劑，然后下壓，再將剛才吸取的清洗劑通過兩個(gè)小孔注入回計(jì)數(shù)池，這就是正反沖，這個(gè)過程一共2次，然后開始排空清洗劑，用稀釋液進(jìn)行全面的清洗，這樣自動(dòng)清洗就完成的，這個(gè)動(dòng)作是無可挑剔的，但問題有兩個(gè)，第一，如果清洗劑質(zhì)量不好也就達(dá)不到效果，而且管路中任何一個(gè)地方泄漏都會(huì)造成空氣進(jìn)入，也就是說吸入的是空氣和清洗劑的混合體，特別是清洗劑用完更換試劑后沒有灌注，管道中有很長一段是空氣，還有就是漏氣造成的清洗劑無法長久保持在4號(hào)閥口，時(shí)間一長會(huì)慢慢回落到清洗劑瓶中，形成氣拴。這樣在吸取清洗劑的時(shí)候由于時(shí)間定量，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)并沒有達(dá)到預(yù)定的吸取量，在注入計(jì)數(shù)池的時(shí)候會(huì)無法注入足夠的清洗劑到計(jì)數(shù)池，在正反沖的時(shí)候也就形成空氣在正反沖而不是清洗劑，這種情況也會(huì)造成清洗劑注入計(jì)數(shù)池的飛濺，導(dǎo)致腐蝕部件特別是上面的按鍵液晶板。第二，程序設(shè)置問題，也就是多少測(cè)試進(jìn)行一次自動(dòng)清洗的問題，儀器的默認(rèn)是50次測(cè)試自動(dòng)進(jìn)行一次，這對(duì)于日標(biāo)本量超過100的單位來說沒有問題，一天可以有2次以上的沖洗，但對(duì)于一天的標(biāo)本量不足50的單位來說，也就意味著永遠(yuǎn)也不會(huì)有自動(dòng)清洗。所以，根據(jù)使用者的具體情況設(shè)定這個(gè)間隔，10-50次任意設(shè)置，前提只有一個(gè)，一定要保證每天有2-4次正反沖的自動(dòng)清洗，這樣會(huì)大大降低堵孔概率。實(shí)際上有很多對(duì)比的例子，我給市內(nèi)安裝儀器的時(shí)候往往講解得比較詳細(xì)，這些設(shè)定都交給他們自己處理，而給鄉(xiāng)鎮(zhèn)安裝的時(shí)候就很少說這些，他們的標(biāo)本非常少，我都是直接給他們?cè)O(shè)定到10次自動(dòng)沖洗，而且明確告訴每天關(guān)機(jī)必須STANDBY，這樣試劑浪費(fèi)點(diǎn)但不出問題，他們也感覺不出來頻繁沖洗帶來的麻煩，呵呵，本來標(biāo)本就少嘛。濃縮試劑告訴他們是堵孔或者本底就是不過的時(shí)候再用，結(jié)果3年下來居然一次都沒用，也沒有堵孔發(fā)生，每次采購試劑干脆就不進(jìn)濃縮液了。而在市內(nèi)的這幾家為了節(jié)省時(shí)間干脆將自動(dòng)清洗間隔到90甚至更多，就算自動(dòng)清洗也給按ESC取消了，每天關(guān)機(jī)也是直接把電源關(guān)掉，根本沒有關(guān)機(jī)步驟，這樣就大大減少了清洗劑正反沖小孔的沖刷清潔作用，一旦堵孔也就是濃縮液處理一下馬上進(jìn)行標(biāo)本或者質(zhì)控測(cè)試，只要在控就不理睬了，其實(shí)這樣會(huì)越積越重，頑固性堵孔往往就在這類單位發(fā)生。所以自動(dòng)清洗的間隔一定要保證每天有2-4次為佳，還有就是關(guān)機(jī)必須要個(gè)操作，執(zhí)行STANDBY，這個(gè)動(dòng)作與自動(dòng)清洗完全一樣，只不過不進(jìn)行清洗液的排空，而是保留清洗液直到下次開機(jī)STARTUP的時(shí)候才排空，所以，這個(gè)清洗劑如果理化指標(biāo)太高，雖然清洗效果好，但對(duì)計(jì)數(shù)池的損傷也很大，HGB透光性不好或者池子發(fā)毛報(bào)廢，除了濃縮液的頻繁使用外這也是主要原因。
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　　出現(xiàn)輕微堵孔，除了濃縮浸泡池子小孔外，就是要檢查負(fù)壓和閥，注意，HGB和WBC公用一個(gè)池子的結(jié)構(gòu)盡可能的不要全池用濃縮液或者次氯酸鈉浸泡，以免長時(shí)間這樣做損傷池子從而影響HGB,可以用注射器吸取次氯酸鈉溶液換上吸樣頭通過后池的管道正反沖小孔然后盡快的排空池子，這樣對(duì)池子的損傷就很小了。嚴(yán)重的堵孔可以先用注射器從后池用空氣正反沖，完全打通小孔通路，再用次氯酸鈉或者濃縮液正反沖，實(shí)在是很嚴(yán)重的就要拆卸下來用超聲波振蕩器處理了。
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　　沒有自動(dòng)清洗的儀器一定要掌握一個(gè)原則，就是把一天的標(biāo)本量平均分成2-4部分，中間加濃縮清洗，一般50次是各個(gè)廠家的統(tǒng)一要求，每個(gè)儀器都有清洗功能，達(dá)到這個(gè)數(shù)量就手工執(zhí)行一次，不要等出現(xiàn)問題再忙活，那樣就晚了，這樣的清洗就是幾塊錢幾分鐘的事情，沒有必要節(jié)省這些，否則維修一次就幾十倍于此。還有就是質(zhì)控的跟進(jìn)，除了每天開機(jī)后的質(zhì)控外，標(biāo)本測(cè)試過程中每隔一定的標(biāo)本就要跟一個(gè)質(zhì)控測(cè)試，時(shí)刻監(jiān)測(cè)儀器狀態(tài)，這樣輕微的堵孔負(fù)壓不足的問題也就能及時(shí)發(fā)現(xiàn)了，很多大的醫(yī)院都是每50個(gè)測(cè)試跟一個(gè)質(zhì)控，各個(gè)醫(yī)院根據(jù)自己的情況決定，維修工程師在維修結(jié)束或者查找問題的時(shí)候，可以選擇一個(gè)較大的測(cè)試區(qū)間內(nèi)分別設(shè)置質(zhì)控監(jiān)測(cè)來判斷問題的所在也是很好的辦法。

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